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Dérivée d'algues microscopiques, l'enzyme convertit les acides gras en ingrédients de départ pour les solvants et les carburants : Science


Bien que de nombreux organismes captent et réagissent à la lumière du soleil, les enzymes - des protéines qui catalysent les réactions biochimiques - sont rarement entraînées par la lumière. Le in addition récent, découvert en 2017. Dérivé d'algues microscopiques, il utilise la lumière bleue pour catalyser la conversion des acides gras, présents dans les graisses et les huiles, en alcanes et alcènes.

«Un nombre croissant de laboratoires envisagent d'utiliser des FAP pour des applications de chimie verte, vehicle les alcanes et les alcènes sont des composants importants des solvants et des carburants, y compris l'essence et les carburants pour avions. Et la transformation des acides gras en alcanes ou alcènes se produit en une seule étape au sein de l'enzyme », explique Martin Weik, responsable d'un groupe de recherche à l'Institut de Biologie Structurale de l'Université Grenoble Alpes.

Weik est un chercheur principal d'une nouvelle étude qui a capturé la séquence complexe de changements structurels subit par FAP en réponse à la lumière. qui entraîne cette transformation des acides gras. le mécanisme fondamental n'a pas été compris. Les scientifiques ne savaient pas combien de temps il fallait à un acide gras pour perdre son carboxylate, le groupe chimique attaché à l'extrémité de sa longue chaîne d'hydrocarbures, une étape critique dans la development d'alcènes ou d'alcanes.

En collaboration avec des scientifiques du SLAC, des expériences à la supply de lumière cohérente Linac (LCLS) du laboratoire national des accélérateurs du SLAC du ministère de l'Énergie ont permis de répondre à bon nombre de ces issues en suspens. Les chercheurs décrivent leurs résultats en science.

Tous les outils dans une boîte à outils

Pour comprendre une enzyme smart à la lumière comme la FAP. ou millionièmes de milliardième de seconde, tandis que les réponses biologiques sont activées. le niveau moléculaire se produit souvent en millièmes de seconde.

"Notre consortium international et interdisciplinaire, dirigé par Frédéric Beisson de l'Université Aix-Marseille, a utilisé une multitude de techniques, notamment la spectroscopie, la cristallographie et les approches informatiques", explique Weik. "C'est la somme de ces différents résultats qui nous a permis d'avoir un leading aperçu du fonctionnement de cette enzyme exclusive en fonction du temps et de l'espace."

Le consortium a d'abord étudié les étapes complexes du processus catalytique dans ses laboratoires à domicile en utilisant des méthodes de spectroscopie optique, qui étudient la construction électronique et géométrique des atomes dans les échantillons, y compris la liaison chimique et la charge. Des expériences spectroscopiques ont identifié les états intermédiaires de l'enzyme accompagnant chaque étape, mesuré leur durée de vie et fourni des informations sur leur mother nature chimique. Ces résultats ont motivé le besoin des capacités ultrarapides du LCLS.

Ensuite, une vue structurelle du processus catalytique a été fournie par cristallographie femtoseconde série (SFX) avec le laser à électrons libres à rayons X LCLS (XFEL). Au cours de ces expériences, un jet de minuscules microcristaux FAP a été frappé par des impulsions laser optiques pour lancer la réaction catalytique, suivies d'impulsions de rayons X extrêmement courtes et ultra-lumineuses pour mesurer les changements résultants dans la construction de l'enzyme.

En intégrant des milliers de ces mesures - acquises à l'aide de divers délais entre les impulsions optiques et les impulsions de rayons X - les chercheurs ont pu suivre les changements structurels de l'enzyme au fil du temps. Ils ont également déterminé la structure de l'état de repos de l'enzyme en sondant sans laser optique.

Étonnamment, les chercheurs ont découvert qu'à l'état de repos, la partie de détection de la lumière de l'enzyme, appelée cofacteur Fad, a une forme courbée. Il absorbe la lumière bleue et initie le processus catalytique», explique Weik. "Nous pensions que le place de départ du cofacteur Fad était strategy, donc cette configuration pliée était inattendue."

La forme courbée du cofacteur Fad a en fait été découverte pour la première fois par cristallographie aux rayons X à l'installation européenne de rayonnement synchrotron, mais les scientifiques soupçonnaient que cette courbure était un artefact de dommages causés par les rayonnements, un problème courant pour les données cristallographiques collectées aux resources de lumière synchrotron. Seules les expériences SFX pourraient confirmer cette configuration inhabituelle en raison de leur capacité distinctive à capturer des informations structurelles avant d'endommager l'échantillon, dit Weik.

"Ces expériences ont été complétées par des calculs", ajoute-t-il, "Sans les calculs quantiques de haut niveau effectués par Tatiana Domratcheva de l'Université d'État de Moscou, nous n'aurions pas compris nos résultats expérimentaux."

Prochaines étapes

des concerns demeurent sans réponse. Par exemple, les chercheurs savent que le dioxyde de carbone se forme au cours d'une certaine étape du processus catalytique à un instant et à un endroit précis, mais ils ne connaissent pas son état lorsqu'il quitte l'enzyme.

«Dans le cadre des travaux futurs de XFEL. déclare Weik. "C'est significant pour la recherche fondamentale, mais cela peut aussi aider les scientifiques à modifier l'enzyme pour effectuer une tâche pour une application spécifique."