Pour la première fois, des scientifiques ont mis au level une enzyme capable de briser les liaisons tenaces créées par l'homme entre le silicium et le carbone qui existent dans des produits chimiques largement utilisés appelés siloxanes ou silicones. Cette découverte constitue une première étape vers la biodégradabilité des produits chimiques qui peuvent persister dans l’environnement.
« La mother nature est une chimiste extraordinaire, et son répertoire comprend désormais la rupture des liaisons dans les siloxanes, que l'on croyait auparavant capables d'échapper aux attaques des organismes vivants », déclare Frances Arnold, professeur Linus Pauling de génie chimique, de bioingénierie et de biochimie à Caltech et lauréate du prix Nobel 2018. en chimie pour ses travaux pionniers sur l'évolution dirigée, une méthode de conception d'enzymes et d'autres protéines utilisant les principes de la sélection artificielle. Arnold et ses collègues, dont Dimitris (Dimi) Katsoulis de Dow Inc. basé au Michigan, ont utilisé l'évolution dirigée pour créer la nouvelle enzyme de clivage des liaisons silicium-carbone. Les résultats sont publiés dans le numéro du 26 janvier de la revue Science.
Les chercheurs affirment que même si les utilisations pratiques de leur enzyme artificielle pourraient encore prendre une décennie ou as well as, son développement ouvre la possibilité que les siloxanes puissent un jour être dégradés biologiquement. « Par exemple, des organismes naturels pourraient évoluer dans des environnements riches en siloxane pour catalyser une réaction similaire, ou des variations encore améliorées d'enzymes développées en laboratoire, comme celle-ci, pourraient éventuellement être utilisées pour traiter les contaminants siloxanes dans les eaux usées », explique Arnold.
Katsoulis explique que la mother nature n'utilise pas de silicium-liaisons carbone, « mais nous le faisons et ce depuis approximativement 80 ans. La character volatile de certains de ces composés justifie des recherches en matière de santé et d'environnement pour bien comprendre les mécanismes de dégradation de ces matériaux dans l'environnement ».
Les produits chimiques siloxanes peuvent être trouvés dans d’innombrables produits, notamment ceux utilisés dans les secteurs de l’entretien ménager, des soins personnels et des industries de l’automobile, de la construction, de l’électronique et de l’aérospatiale. Le squelette chimique des composés est constitué de silicium-des liaisons oxygène, tandis que des groupes contenant du carbone, souvent méthyle, sont attachés aux atomes de silicium. « Le squelette silicium-oxygène confère au polymère un caractère inorganique tandis que les groupes silicium-méthyle confèrent au polymère des caractéristiques organiques. Ainsi, ces polymères ont des propriétés matérielles uniques, telles qu'une stabilité thermique et oxydative élevée, une faible stress superficielle et une grande flexibilité de la construction, entre autres », déclare Katsoulis.
On pense que les siloxanes persistent dans l’environnement pendant des jours, voire des mois. C’est pourquoi les recherches en cours visent à fournir une meilleure compréhension scientifique de la sécurité sanitaire et environnementale des matériaux à foundation de silicone. Les produits chimiques commencent naturellement à se fragmenter en morceaux furthermore petits, en particulier dans le sol ou dans les environnements aquatiques, et ces fragments deviennent volatils ou s'échappent dans l'air, où ils subissent une dégradation en réagissant avec les radicaux libres présents dans l'atmosphère. De toutes les liaisons des siloxanes, le silicium-les liaisons carbone sont les plus lentes à se décomposer.
Katsoulis a contacté Arnold pour collaborer aux initiatives visant à accélérer la dégradation du siloxane après avoir pris connaissance des travaux de son laboratoire visant à inciter la character à produire du silicium.-liaisons carbone. En 2016, Arnold et ses collègues ont utilisé l'évolution dirigée pour concevoir une protéine bactérienne appelée cytochrome c afin de previous du silicium.-liaisons carbone, un processus qui ne se produit pas dans la mother nature. « Nous avons décidé de faire en sorte que la character fasse ce que seuls les chimistes peuvent faire – mais en mieux », a déclaré Arnold dans un communiqué de presse de Caltech. La recherche a démontré que la biologie pouvait établir ces liaisons de manière in addition respectueuse de l’environnement que celles traditionnellement utilisées par les chimistes.
Dans la nouvelle étude, les chercheurs voulaient trouver des moyens de briser les liens plutôt que de les créer. Les scientifiques ont utilisé l’évolution dirigée pour développer une enzyme bactérienne appelée cytochrome P450. L'évolution dirigée est similaire à celle des chiens ou des chevaux reproducteurs dans la mesure où le processus est conçu pour faire ressortir les attributes souhaités. Les chercheurs ont d’abord identifié une variante du cytochrome P450 dans leur assortment d’enzymes qui avait une très faible capacité à briser le silicium.-liaisons carbone dans les méthylsiloxanes volatils dits linéaires et cycliques, un sous-groupe commun de la famille des siloxanes.
Ils ont muté l’ADN du cytochrome P450 et testé les nouvelles enzymes variantes. Les furthermore performants ont ensuite été à nouveau mutés et les exams ont été répétés jusqu'à ce que l'enzyme soit suffisamment active pour permettre aux chercheurs d'identifier les produits de la réaction et d'étudier le mécanisme par lequel l'enzyme fonctionne.
« L'évolution des enzymes pour rompre ces liaisons dans les siloxanes présentait des obstructions uniques. Avec une évolution dirigée, nous devons évaluer des centaines de nouvelles enzymes en parallèle pour identifier quelques variantes enzymatiques ayant une activité améliorée », explique Tyler Fulton (PhD དྷ), co-auteur principal. de l'étude et chercheur postdoctoral à Caltech dans le laboratoire d'Arnold. L’un des défis impliquait les molécules de siloxane qui lixiviaient les composants en plastique des plaques à 96 puits utilisées pour cribler les variantes. Pour résoudre le problème, l’équipe a créé de nouvelles plaques fabriquées à partir de fournitures de laboratoire courantes.
« Un autre défi consistait à trouver l'enzyme de départ pour le processus d'évolution dirigée, une enzyme possédant ne serait-ce qu'une infime quantité de l'activité souhaitée », explique Arnold. « Nous l'avons trouvé dans notre selection special de cytochromes P450 développés en laboratoire pour d'autres kinds de chimie du silicium nouvelle dans la character. »
L'enzyme améliorée finale ne coupe pas directement la liaison silicium-carbone mais oxyde plutôt un groupe méthyle dans les siloxanes en deux étapes séquentielles. Fondamentalement, cela signifie que deux carbone-les liaisons hydrogène sont remplacées par du carbone-liaisons oxygène, et ce changement permet à la liaison silicium-carbone de se rompre moreover facilement.
La recherche établit des parallèles avec des études impliquant une enzyme mangeuse de plastique, explique Fulton, faisant référence à une enzyme dégradant le polyéthylène téréphtalate (PET) découverte dans la bactérie Ideonella sakaiensis en 2016 par un autre groupe de chercheurs. « Bien que l'enzyme de dégradation du PET ait été découverte par la mother nature plutôt que par les ingénieurs, cette enzyme a inspiré d'autres improvements qui se concrétisent enfin pour la dégradation du plastique. Nous espérons que cette démonstration inspirera également de nouveaux travaux pour aider à décomposer les composés siloxanes », dit-il..
